CIPAC方法在國際農(nóng)藥產(chǎn)品標準應用和國際貿(mào)易仲裁中發(fā)揮著十分重要的作用，也是我國農(nóng)藥產(chǎn)品化學方法標準制定的重要參考。CIPAC方法一直具有較高的先進性，隨著農(nóng)藥產(chǎn)品的更新?lián)Q代和分析技術的不斷提高，CIPAC方法也在不斷更新。本文對國內農(nóng)藥質量管理中常用的CIPAC理化試驗方法進行了總結和梳理，并詳細對比了近5年來6個CIPAC理化試驗方法的修訂情況，為讀者進一步了解CIPAC理化試驗方法的最新動態(tài)和及時跟進相關方法修訂提供參考。
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CIPAC方法簡介
國際農(nóng)藥分析合作委員會（CIPAC）是一個國際性、非營利性、非政府組織，主要負責組織制定農(nóng)藥成分（有效成分、相關雜質、限用成分、溶劑等）分析方法、理化參數(shù)測定等，旨在推動農(nóng)藥相關檢測方法在實驗室間的評估，促進相關檢測方法的國際協(xié)調。CIPAC方法在國際上具有較高的權威性，其制定的農(nóng)藥原藥和制劑分析方法也是支持應用FAO/WHO國際農(nóng)藥標準的指定分析方法。
CIPAC方法的名稱通常由英文字母代碼和數(shù)字代碼組成。數(shù)字代碼一般是CIPAC編碼系統(tǒng)賦予農(nóng)藥有效成分或相關方法的唯一編號，是每個CIPAC方法的唯一“身份證”。字母代碼表示CIPAC方法的不同類型，主要包括以下五類：（1）農(nóng)藥原藥及其制劑的分析方法（M， ）；（2）農(nóng)藥分析（包括定量滴定分析）所需的各種試劑、指示劑和溶劑的制備、校準方法和用途（RE， 和 ）；（3）CIPAC方法所需的各種測量技術，即物理測量方法和化學測量方法（MT， ）；（4）對農(nóng)藥原藥進行純化以獲得適當純度化學品的方法（PP， Pure ）；（5）農(nóng)藥原藥和制劑的紅外光譜和紫外分光光度測定法。M、MT和RE方法是CIPAC方法中最常見的，也是目前應用最廣泛的方法。
CIPAC方法收錄于CIPAC手冊中。自1980年出版1A卷以來，CIPAC手冊已出版15卷，涵蓋農(nóng)藥有效成分和雜質分析方法400余種，通用理化參數(shù)測定方法200余種。截至2021年，CIPAC手冊已更新至P卷，最新一卷預計于2024年出版。
02
CIPAC理化測試（MT）方法介紹
CIPAC MT方法涵蓋了農(nóng)藥原藥和制劑理化參數(shù)及質量控制指標測定所需的各種方法。CIPAC編碼系統(tǒng)按照MT方法發(fā)表的先后順序對方法進行編號。方法修訂時，方法名稱保留原編號，并按1、2、3等順序依次更新，如MT 46和MT 46.4。
目前，機器翻譯方法已更新至MT 200，本文對常用的機器翻譯方法進行了總結（表1）。
表1 農(nóng)藥原藥及制劑理化項目測定方法一覽表
注：耐磨性測定方法“/”于2023年被批準為臨時方法，尚無卷號。
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CIPAC MT 方法修訂比較
近五年來，共制定、修訂了9項CIPAC MT方法。其中，水分（MT 30.6）、顆粒流動性（MT 172.2）、懸浮率（MT 184.1）、加速貯存穩(wěn)定性（MT 46.4）、耐磨性（MT 178.3）、拋射劑噴霧速率、噴霧劑噴霧速率、懸浮液自發(fā)分散（MT 160.1）的測定方法被接受為CIPAC官方方法。濕篩試驗（MT 185.1）測定方法在2023年于德國舉行的第67屆CIPAC會議上被批準為CIPAC臨時方法。以下是水分、加速貯存穩(wěn)定性、顆粒流動性、懸浮率、濕篩試驗、耐磨性的測定方法修訂前后主要變化的詳細對比。
3.1 農(nóng)藥水分測定方法
2019年，使用無吡啶試劑的卡爾費休法MT 30.6被接受為CIPAC官方方法，替代MT 30.5。與MT 30.5相比，MT 30.6主要有兩處修訂。一是在卡爾費休容量法基礎上增加了卡爾費休庫侖法?？栙M休容量法適用于0.1%以上水分含量樣品的測定，而卡爾費休庫侖法對水分更為敏感，適用于0.001%～1%水分含量樣品的測定。尤其對于水分含量小于0.5%的樣品，更建議采用庫侖法。二是修訂了卡爾費休容量法中的稱樣量。修訂后，滴定相同水分含量所需的樣品量和所消耗的試劑體積均有所減少（表2）。
表2 卡爾費休容量法稱量與水分含量對應關系
3.2 顆粒流動性試驗
流動性試驗主要用于評價農(nóng)藥顆粒劑型貯存后是否發(fā)生結塊、分散困難等情況。2019年，MT 172.2被接受為CIPAC官方方法，試驗結果與MT 172.1等效。與MT 172.1相比，MT 172.2在試驗操作部分（圖1）更詳細地描述了樣品熱貯后不滴、滴5次、滴20次流動性的評價流程，并增加了新的流動性計算公式和結果報告格式。
此外量筒的使用方法，MT 172.2還對方法文本做了相應修改，包括增加了試驗裝置圖及熱貯存條件（與加速貯存穩(wěn)定性試驗相同），更新了試驗篩的參考依據(jù)，刪除了孔徑為4.75mm的試驗篩及對橡膠墊硬度的要求。
圖1 顆粒制劑流動性評價流程及報告格式
目前我國在農(nóng)藥登記產(chǎn)品化學信息要求中尚無對顆粒制劑流動性的任何要求，也沒有建立產(chǎn)品流動性測定的方法標準。
3.3 懸浮率試驗
2019年，暫停率測定方法MT 184.1被接受為CIPAC官方方法。與MT 184相比，MT 184.1有以下變化。
3.3.1 修改了樣品懸浮液的制備方法
MT 184中將固體樣品懸浮液的制備分為預漿化（有）和非預漿化（有）兩種方法，MT 184.1在內容上對兩種制備方法進行了修訂和統(tǒng)一，并將非預漿化的具體操作流程放入注解中，具體修訂內容如下（表3）。
另外需要注意的是，MT 184并沒有要求對于液體樣品預先在量筒中加入標準硬水，但是MT 184.1規(guī)定必須預先在量筒中加入100～200mL標準硬水，或者直接在盛有標準硬水的量筒中稱量樣品。
表3 樣品懸浮液制備方法比較
3.3.2 MT 184.1修改了方法的適用濃度范圍
懸浮率的測定應當以產(chǎn)品的實際建議使用濃度為準，如有多個建議濃度，建議在方法適用濃度范圍內以最高和最低推薦濃度測定懸浮率。MT 184規(guī)定，實際最低濃度不足0.2%的，按0.2%測定。MT 184.1將方法適用濃度范圍修改為0.1%～10%。對于建議濃度不足0.1%的產(chǎn)品，應按0.1%制備樣品溶液，考慮到過量樣品的沉淀會影響實際定容，實際濃度>10%的，應按10%制備。
3.3.3 MT 184.1 與 MT 184 之間的一個主要變化是引入了再懸?。≧e-）的概念和確定方法
懸浮率測定時，用標準硬水配制樣品后，在量筒中顛倒30次，靜置30分鐘，可直接取9/10體積的懸浮液，測定剩余1/10體積液體中有效成分的含量。修訂后的MT 184.1考慮到在實際田間作業(yè)過程中，有些配制好的農(nóng)藥溶液放置一段時間后，稍加攪拌就很容易再分散。因此，對于懸浮率低于60%或高于105%的產(chǎn)品，需要在懸浮率測定的基礎上再測定再懸浮率，即先將樣品溶液靜置30分鐘，然后顛倒30次，再進行懸浮率測定步驟。 目前，我國《農(nóng)藥懸浮率測定方法》（GB 14825-2006）尚未對再懸浮率做出要求和規(guī)定。
3.3.4 為了方便操作,MT 184.1的方法溫度要求由(30±2)℃改為室溫(25±5)℃
此外，MT 184.1還對方法的一些細節(jié)做了修改，詳見表4。
表 4 MT 184.1 修訂摘要
3.4 加速儲存穩(wěn)定性試驗
2020年，MT 46.4被接受為CIPAC官方方法，取代現(xiàn)有所有版本的加速貯存穩(wěn)定性試驗方法MT 46。作為所有制劑加速貯存穩(wěn)定性試驗的統(tǒng)一方法，MT 46.4中加速貯存條件與舊版相比保持不變量筒的使用方法，主要協(xié)調了不同劑型的加速貯存程序。其中，液體、粉末、顆粒制劑可轉入密封玻璃瓶貯存，或直接置于包裝袋中貯存；長效蚊帳（LN）和長效貯存袋（LB）可根據(jù)相關規(guī)格或分析方法裝入所需尺寸和數(shù)量的玻璃瓶中，或直接置于包裝袋中貯存；骨架釋放劑型（MR）需將每個樣品用鋁箔單獨包裹并置于密封袋中貯存，以避免貯存過程中有效成分的遷移，或直接置于包裝袋中貯存。
3.5 耐磨性試驗
舊版本中MT 178和MT 178.2分別規(guī)定了顆粒劑和水分散性顆粒劑的耐磨性試驗方法，最新修訂的MT178.3將兩種方法合并，合并后的方法適用范圍更廣，可用于測定各種顆粒制劑在正常運輸、儲存和裝卸過程中的磨損情況。
測定顆粒、片劑、可溶性片和水分散片的耐磨性時，應加入等量的玻璃珠以增加篩分過程中的摩擦力。MT 178.3詳細描述了不同粒徑玻璃珠與樣品的分離，具體過程（圖2）為：（a）當玻璃珠粒徑大于樣品時，先用粗網(wǎng)篩篩出未磨損的樣品和磨損的顆粒，再用125μm的篩子篩分；（b）當樣品粒徑大于玻璃珠時，先用粗網(wǎng)篩篩出未磨損的樣品，再將玻璃珠和磨損顆粒通過較小的網(wǎng)眼篩分，最后將未磨損的樣品和磨損顆粒合并在125μm的篩子上篩分； （c）若樣品與玻璃珠難以分離，可用鑷子直接將玻璃珠取出，再用125μm篩子將過篩后脫落的顆粒篩出。對于水分散粒劑、乳油粒劑和可溶性粒劑，在測定過程中不必添加玻璃珠。
(a) 玻璃珠的粒徑大于樣品的粒徑；(b) 樣品的粒徑大于玻璃珠的粒徑；(c) 玻璃珠很難從樣品中分離出來
圖2 篩分前樣品與玻璃珠分離實驗過程
MT 178.3還簡化了篩后樣品的稱量程序。在計算產(chǎn)品的脫落率時，MT 178和MT 178.2都需要將125μm篩上未磨損的樣品轉移到表面皿上稱量。MT178.3分別稱量篩子、篩子總重量和未磨損樣品，計算兩者的差值，得到未磨損樣品的重量。
此外，新修訂的MT178.3還增加了新的報告要求，包括：（1）耐磨性報告結果必須精確到0.1%；（2）如果藥片在包裝內受損，必須在報告中說明。
3.6 濕篩試驗
MT 185.1對MT 182（循環(huán)水濕篩法）和MT 185進行了修訂和合并。與MT 182和MT 185相比，MT 185.1中需要特別注意以下變化：（1）沖洗濕篩上殘留物的水流量發(fā)生了變化，水流量由原來的4-5 L/min改為1-5 L/min，同時規(guī)定在沖洗過程中若無可見殘留物，則可停止試驗。（2）試驗溫度發(fā)生了變化，MT 185和MT 182規(guī)定用于沖洗試樣溶液的自來水溫度必須控制在5-15℃。MT 185.1最新修訂版取消了對水溫的單獨規(guī)定，要求所有操作均在室溫（20-30℃）下進行。 此外，濕篩后殘渣的干燥溫度也由原法規(guī)定的60-70℃改為70℃，僅在注釋中說明可適當降低溫度以避免樣品分解。（3）MT 185.1增加了濕篩殘渣的計算公式和報告要求。殘渣稱量的精度要求由0.01g改為0.001g，報告中濕篩上殘留的殘渣必須精確到0.1%，若無可見殘渣，可不稱量將結果記錄為<0.1%。
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總結
通過對比上述理化測定方法可以看出，CIPAC法的修訂涉及文字描述、方法操作、結果報告等多個方面，具有以下特點：一是科學性強。新修訂的方法考慮了實際操作，在不影響實驗結果的前提下，刪除了一些不必要的要求。例如，在多個方法中刪除了對試驗溫度的具體要求。二是更加規(guī)范。針對過去對同一指示劑、不同制劑有多種方法的情況，最新修訂后已協(xié)調統(tǒng)一為單一方法，不僅擴大了方法的使用范圍，而且提高了方法應用的便捷性。三是更加先進。隨著科技的進步和分析水平的提高，舊的分析方法精密度低、操作繁瑣，難以滿足現(xiàn)在分析測試的要求。在修訂CIPAC法時，引入了新技術、新設備，更新了方法操作和報告的要求，有效提高了方法應用的實用性。 分析人員在引用CIPAC方法時，應特別注意方法的更新，了解方法修訂的內容和細節(jié)，盡可能使用最新發(fā)布的方法；若使用舊版本方法，還需注意使用不同版本方法的測定結果是否等效。
