膜片鉗全細(xì)胞模式
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1976年西班牙馬普生物化學(xué)研究所Neher和創(chuàng)建了膜片鉗技術(shù)（patchclamp）。這是一種以記錄通過(guò)離子通道的離子電壓來(lái)反映細(xì)胞膜單一的或多個(gè)的離子通道分子活動(dòng)的技術(shù)。它和基因克隆技術(shù)（gene）并架齊驅(qū)，給生命科學(xué)研究帶來(lái)了巨大的前進(jìn)動(dòng)力。
在倒置顯微鏡下細(xì)胞膜片，讓微電極逐漸緊靠細(xì)胞，當(dāng)微電極與細(xì)胞接觸時(shí)，給微電極一個(gè)很小的負(fù)壓，產(chǎn)生吉?dú)W封接，之后再給微電極管里一個(gè)很小的負(fù)壓，致使電極覆蓋下的細(xì)胞膜斷裂，因而促使電極液和細(xì)胞內(nèi)液想通，而和浴室里的氨水絕緣，產(chǎn)生了全細(xì)胞模式。全細(xì)胞模式不是記錄小片膜的離子電壓，而是記錄全細(xì)胞的離子電壓。雖然電極里的膜片被吸破，但是微電極和細(xì)胞封接的阻抗很高，這是保持全細(xì)胞記錄的重要條件。
用抗生素或則毒素等非生理智成份更換掉電極內(nèi)液，對(duì)電流依賴性通道由于抗生素而遭到哪些影響而進(jìn)行研究。因而在通道開(kāi)關(guān)動(dòng)力學(xué)，對(duì)抗生素作用的功能機(jī)制在微觀水平上進(jìn)行研究。還能否對(duì)內(nèi)外液的含量成份進(jìn)行任意的改變，來(lái)對(duì)各組分對(duì)膜私密性的影響進(jìn)行研究，尤其是氫離子和鈣離子的含量要適當(dāng)。也可以在膜受體相應(yīng)地使用興奮劑，在對(duì)離子通道電壓流動(dòng)的檢測(cè)過(guò)程中，對(duì)經(jīng)G蛋白介導(dǎo)的第二信使作用進(jìn)行了解，對(duì)跨膜信息轉(zhuǎn)導(dǎo)進(jìn)行研究。
全細(xì)胞模式中，電極內(nèi)液和細(xì)胞內(nèi)液擴(kuò)散混和除了會(huì)促使細(xì)胞內(nèi)液的成份發(fā)生變化進(jìn)而造成細(xì)胞的電變化遭到影響，并且還常常讓全細(xì)胞記錄發(fā)生rundown現(xiàn)象。為了避免此情況的發(fā)生，須要用穿孔膜片鉗法（patch），就是在微電極中充灌制霉菌素（）和二性霉素（）,和細(xì)胞膜中的甾體形成反應(yīng)后，生成了較大顆粒不能否通過(guò)并且一價(jià)離子容許通過(guò)的小孔，這種小孔導(dǎo)電，對(duì)所記錄的電壓不會(huì)形成影響，和二性霉素相比，制霉菌素有愈發(fā)好的療效。
2005-04-28瀏覽次數(shù)：1534次
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熱門(mén)標(biāo)簽：膜片鉗與其他技術(shù)的結(jié)合使用以及實(shí)驗(yàn)中的常用術(shù)語(yǔ)膜片鉗離子通道的生理功能和特點(diǎn)
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